COLESTEROL TOTAL

COLESTEROL TOTAL

Generalidad

El colesterol es un esteroide sintetizado en muchos tejidos, especialmente en el hígado, la corteza supra-renal, en la pared intestinal, en las gónadas y la aorta.

El colesterol se origina ¼ de la alimentación y ¾ de la síntesis endógena. Un aumento en la dieta de colesterol disminuye la cuota endógena. La cuota de colesterol intestinal está controlada por la concentración en el intestino de las sales biliares. El colesterol, en relación con la alimentación, es esterificado desde las células intestinales. La cuota endógena es esterificada desde el hígado.

El significado del colesterol en cada una de sus fracciones es diferente:

VLDL: incierto (utilización directa con los tejidos periféricos).

LDL: medio de transporte a las células.

HDL: aporte desde las células.

Indicaciones

La determinación del colesterol se hace en la patología del metabolismo lipídico y lipoproteico. El colesterol circula en parte libre y en parte estereficado con ácidos grasos.

La estereficación se cumple en el hígado.

El aumento del colesterol se encuentra en algunas enfermedades hereditarias y en la alimentación no adecuada, en el hipotiroidismo, en el síndrome nefrótico, en la enfermedad de Cushing, en la diabetes mellitus, en la pancreatitis, en la glicogenosis tipo I, III, VI, y también en las glomerulonefritis.

La disminución del colesterol se encuentra en el déficit de alfa lipoproteína, en la insuficiencia hepática, hipertiroidismo, caquexia, mala nutrición, uremia, septicemia, enfermedad de Addison.

Modalidad de solicitud

Sólo rutina.

Preparación del paciente

Necesario ayuno al menos 6-8 horas, no tomar alcohol al menos 72 horas antes de la toma de muestra.

Modalidad de la toma de muestra

Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisular y, por consiguiente, un aumento de colesterol hemático.

Transporte

Transportar a temperatura ambiente.

Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC, y 5-7 días a + 4oC, 2 meses a –20oC.

Verificación de la muestra

Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.

A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra

Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.

C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrifugadora de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y centrifugar a 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no idoneidad de la muestra.

Método de determinación:

Metodología enzimática colorimétrica (CHOD-POD)

El colesterol es determinado por la hidrólisis y oxidación enzimática. El indicador

quinonamine es formado de peróxido de hidrógeno y 4 amino antipirina con la presencia de fenol y peroxidasa.

Colesterolester + H2O CHE colesterol- ácido graso

—>

Colesterol + O2 CHO colesteno 3-ona + H2O

——>

H2O2 + aminoantipirina + fenol POD quinonamino + 4 H2O

——>

Materiales

 Guantes desechables no estériles

 Tubos de ensayo 16 x 100 mm

 Puntas de pipeta 10-50 ul

 Puntas de pipeta 50-200 ul

 Puntas de pipeta 200-1000 ul

 Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos

Centrifugadora

Espectrofotómetro

Baño María

Reloj marcador

Pipetas automáticas 10-50 ul

Pipetas automáticas 50-200 ul

Pipetas automáticas 200-1000 ul

Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento

Seguir las instrucciones de la casa comercial.

Control de Calidad

Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las muestras.

Notas sobre el método:

Linealidad

El método es lineal hasta 800.0 mg/dl.

Sensibilidad

El método tiene una sensibilidad de 3.0 mg/dl.

Especificidad

El método es específico para colesterol.

Interferencias

Suero ictérico con bilirrubina > 25.0 mg/dl.

Hemólisis hemoglobina > 7.0 g/L.

Lipemia: triglicéridos > 2500.0 mg/dl.

Ácido ascórbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, fluoruro) pueden interferir y dar resultados falsamente bajos.

Valor de referencia

Hasta 200.0 mg/dl.

Criterio de validación

Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol HDL, VLDL, apolipoproteínas).

Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón, funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.

Modo de escribir los resultados

El colesterol se escribe sin cifra decimal.